Twieflingen ist eine Gemeinde im Landkreis Cuxhaven in Niedersachsen. Sie liegt am Zusammenfluß von Oste, Twiede und Straßenbecke, etwa 11 km nordwestlich von Hemmoor. Im Jahr 2020 hatte die Gemeinde etwa 3300 Einwohner.
Twieflingen wurde vermutlich zum ersten Mal im Jahr 1218 erwähnt. Zu Beginn des 14. Jahrhunderts waren die Grafen von Oldenburg dort ansässig. 1786 wurde Twieflingen zu einer selbstständigen Gemeinde. Heute ist sie ein beliebter Ausgangsort für Wanderungen und Radtouren durch die niedersächsische Marsch.
Der Ort wird seit 1990 von der Freiwilligen Feuerwehr Twieflingen bewacht. Es gibt auch noch eine Jugendfeuerwehr, die 2001
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